modélisation de l'expérience
Expérience historique de Meselson et Stahl
Expérience historique de Meselson et Stahl
Princcipe de l'expérience de Meselson et Stahl
Pour trouver le bon modèle, Meselson et Stahl ont réalisé les expériences suivantes :
Des bactéries sont cultivées pendant de nombreux cycles cellulaires dans un milieu enrichi en azote lourd (15N). Cela permet la synthèse d’ADN parental. Puis ces bactéries sont cultivées dans un milieu enrichi en azote léger (14N). A chaque réplication, l’azote, qu’il soit lourd ou léger, s’incorpore à l’ADN néoformé de la bactérie. Un échantillon de chaque culture est prélevé, puis l’ADN bactérien est extrait, placé dans un tube et centrifugé. Cela permet d’évaluer la proportion d’ADN lourd (avec 15N), léger (avec 14N) ou mixte (avec 14N et 15N). Sous l’effet de la centrifugation, l’ADN forme une bande dans le gradient de saccharose.
Modélisation de l'expérience de Meselson et Stahl
Matériel :
- 3 tubes à essai à préparer
- 6 pipettes
- 3 solutions étiquetées de saccharose de concentration respective à 65%- 45%- 25%
- 3 solutions colorées :
- jaune simulant l’ADN contenant du N14
- vert simulant l’ADN contenant du N14 et du N15
- bleue simulant l’ADN contenant du N15
Protocole :
PRÉPARATION DES GRADIENTS DE SACCHAROSE :
Dans chaque tube, verser très délicatement en faisant couler petit à petit le long de la paroi et en changeant de pipette pour chaque concentration :
1 cm de solution de saccharose à 65%
Puis au-dessus, avec la même précaution, 1 cm de solution de saccharose à 45%, ne pas mélanger !
Puis au-dessus, avec la même précaution, 1 cm de solution de saccharose à 25 %, ne pas mélanger !
DÉPOSER DOUCEMENT LE TUBE SUR LE PORTE-TUBE.
SIMULATION DES RESULTATS DE L’EXPERIENCE :
Incliner le tube 1. Y verser le long de la paroi, 7 gouttes de solution bleue ; reposer doucement le tube sur le porte-tube.
Réitérer la manipulation avec le tube 2 : verser le long de la paroi, 7 gouttes de solution jaune; reposer doucement le tube sur le porte-tube.
Réitérer la manipulation avec le tube 3 : verser le long de la paroi, 7 gouttes